感染了西尼羅病毒會導(dǎo)致包括腦炎等一系列癥狀的疾病，西尼羅病毒在世界廣泛傳播，已在50多個國家檢測出該病毒。本試驗經(jīng)CDC提供的試劑檢驗與驗證。本試驗使用了一種稱為WNRA的重組抗原，它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學(xué)指標，WNRA蛋白是一種重組抗原，它是由含有西尼羅病毒兩個抗原的序列多肽構(gòu)成。

實驗的原理

檢測西尼羅病毒IgG ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。

提供的材料

微孔板（96孔 12x8）：即用每孔均包被結(jié)合西尼羅重組抗原的單抗。2－8℃下保存至保質(zhì)期。

注意：WNRA和NCA已包被于微孔板。

IgG樣品稀釋液：1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
IgG陰性質(zhì)控：1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存，將其分裝于小瓶里，在-70℃下儲存。
IgG陽性質(zhì)控：1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存，將其分裝于小瓶里，在-70℃下儲存。
洗滌液（10X）：1瓶 120ml 2－8℃下保存至使用。
EnWash：1瓶 20ml 2－8℃下保存至使用。
酶聯(lián)物：一瓶6ml 即用 2－8℃下保存至使用。
TMB底物液： 1支 9ml 即用 2－8℃下保存至使用。
終止液；1支6ml 即用 2－8℃下保存至使用。

試劑應(yīng)避免反復(fù)凍融。

西尼羅河病毒IgG、IgM聯(lián)合診斷試劑盒

西尼羅河熱IgG抗體檢測試劑盒（ELISA法）

操作步驟：

標記將要使用的板條，注意微孔板已經(jīng)按照統(tǒng)一排列，如下所述包被西尼羅抗原和質(zhì)控抗原。

西尼羅抗原
西尼羅抗原	板條＃1	板條＃2
A	WNRA	WNRA
B	WNRA	WNRA
C	WNRA	WNRA
D	WNRA	WNRA
E	NCA	NCA
F	NCA	NCA
G	NCA	NCA
H	NCA	NCA

將血清樣品﹑陰性質(zhì)控和陽性質(zhì)控同樣地用樣每孔加入50ul稀釋后的樣品，以下為一個血清樣品使用一個板條的*。
品稀釋液按1：300稀釋。

	板條1	板條2
	血清樣品
A	IgG N		樣品1
B	IgG N		樣品1
C	IgG P		樣品2
D	IgG P		樣品2
E	IgG P		樣品2
F	IgG P		樣品2
G	IgG N		樣品1
H	IgG N		樣品1

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這一效率可以相差若干個數(shù)量級，它起決于：a.受體細胞的型別（即使同一細胞系，克在化膿性球菌中，肺炎鏈球菌的致病力僅次于金黃色葡萄球菌。不同的是，到目前為止，肺炎鏈球菌極少對青霉素類抗生素產(chǎn)生耐藥性。肺炎球菌主要的致病物質(zhì)是肺炎球菌溶血素及莢膜。莢膜具有抗原性，是肺炎鏈球菌分型的依據(jù) 。此菌可引起大葉性肺炎、腦膜炎、支氣管炎等疾病。生物學(xué)性狀編輯肺炎鏈球菌電鏡下的形態(tài)肺炎鏈球菌電鏡下的形態(tài)⒈菌體呈矛頭狀，多成雙排列，寬端相對，*相背，有較厚莢膜，革蘭陽性.⒉培養(yǎng)特性和生化反應(yīng) 營養(yǎng) 要求及在血平板上菌落特征基本同甲型鏈球菌，培養(yǎng)時間稍久菌落中央下陷呈臍窩狀.在血清肉湯中培養(yǎng)稍久亦因細菌自溶而使混濁的培養(yǎng)液漸變澄清.自溶酶可被膽汁或膽鹽等物質(zhì)活化，加速細菌溶解，故可用膽汁溶菌試驗與甲型鏈球菌相區(qū)別；肺炎鏈球菌能分解菊糖這點也可作為與甲型鏈球菌相區(qū)別的依據(jù).⒊抗原結(jié)構(gòu)與分型⑴莢膜多糖抗原按此抗原不同分為84個血清型，個別型還可分成不同的亞型.其中有20多個型可引起疾病.

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